Действия происходят в пятом веке до нашей эры, в то время когда между персами и греками шла жестокая кровопролитная война. Сюжет фильма «300 спартанцев: Расцвет империи» расскажет о становлении великого персидского царя Ксеркса. Когда его отец царь Дарий умирал от тяжелых ран, которые получил, участвуя в Марафонской битве, он сказал наследнику никогда не идти войной на греков. Дарий сказал сыну, что наказать их могут только Боги. Это их право и ничьё больше. Ксеркс всегда помнил приказ отца, и покорно выполнял его. Но вскоре он возвысился и стал неимоверно могущественным правителем. Он настолько уверился в своей силе и мощи армии, что решил нарушить посмертный указ Дария. Ксеркс объявил себя Богом, а поскольку теперь он существо не человеческое, а божественное, значит можно идти против спартанцев. Во главе греческой армии стоит Фемистокл. Он создал флот Афин. Хоть греческий флот и велик, но все же персы оказываются сильнее, ведь им на помощь приходит воительница Артемисия. Она отлично справлялась с не женским делом, командованием персидскими кораблями в море. Греки будут вынуждены постараться, потому что на этот раз им будет очень сложно вырвать победу из рук персов. Фемистокл разрабатывает стратегию борьбы с персидскими кораблями. Он понимает, что на кону стоит многое, и они не могут позволить себе проиграть Ксерксу. В фильме «300 спартанцев: Расцвет империи» показаны битвы при Палатее и Саламине. А для того чтобы победить персов грекам пришлось вспомнить о своём прирождённом даре и хитростью добиться полного разгрома их армии.